陽離子脂質(zhì)材料在經(jīng)轉(zhuǎn)染和表達(dá)過程中，有諸多因素均會(huì)影響表達(dá)效率，如細(xì)胞所處的周期、脂質(zhì)體與質(zhì)粒的比例、質(zhì)粒DNA的大小及構(gòu)型、脂質(zhì)體/DNA復(fù)合物的正負(fù)電荷比例和大小等。

　　

　　影響因素：

　　

　　1、細(xì)胞所處的周期

　　

　　細(xì)胞轉(zhuǎn)染是一個(gè)多步驟、復(fù)雜的過程，包括細(xì)胞攝取、胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)和核孔轉(zhuǎn)運(yùn)。目前普遍認(rèn)為抑制DNA釋放的因素以及DNA進(jìn)入細(xì)胞核的干擾因素，均對(duì)陽性脂質(zhì)體介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)染產(chǎn)生重要影響。細(xì)胞在有絲分裂時(shí)，外源性DNA更容易被細(xì)胞核攝取。

　　

　　由此認(rèn)為，DNA進(jìn)入細(xì)胞核的一個(gè)主要機(jī)制是依賴于細(xì)胞分裂時(shí)的有絲分裂被動(dòng)進(jìn)入胞核。此外，脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染效率還跟轉(zhuǎn)染時(shí)間、轉(zhuǎn)染細(xì)胞的類型、轉(zhuǎn)染細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)及融合程度等因素有關(guān)。

　　

　　2、質(zhì)粒DNA的大小及構(gòu)型

　　

　　有相關(guān)研究把陽離子脂質(zhì)材料作為基因載體，并將3種構(gòu)型（超螺旋、開環(huán)和線型）的質(zhì)粒DNA分別轉(zhuǎn)染Vero細(xì)胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)超螺旋質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)染效率高。

　　

　　此外，也有實(shí)驗(yàn)表明小于100bp的DNA片段可以在細(xì)胞質(zhì)中自由移動(dòng)。然而隨著DNA片段的增大，其在細(xì)胞質(zhì)中的遷移能力也隨之降低。這是由于核孔對(duì)于進(jìn)入細(xì)胞核的DNA有大小限制的作用。

　　

　　3、脂質(zhì)體/DNA復(fù)合物的正負(fù)電荷比例和大小

　　

　　脂質(zhì)體/DNA復(fù)合物中兩者的正負(fù)電荷比例是影響基因轉(zhuǎn)染效率的重要因素。其中的一個(gè)重要原因是，兩者所帶電荷比例可直接影響復(fù)合物的粒徑，而當(dāng)復(fù)合物的直徑尺寸在0.4-1.4um范圍內(nèi)時(shí)，具有較高的轉(zhuǎn)染效率。

　　

　　以上是影響陽離子脂質(zhì)材料轉(zhuǎn)染效率的幾個(gè)常見的因素，在這些影響因素中，對(duì)無血清細(xì)胞培養(yǎng)基的開發(fā)和利用無疑是提高細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的一條重要途徑。